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相机视野相关介绍

jf_64961214 来源:jf_64961214 作者:jf_64961214 2025-03-18 06:21 次阅读
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图 1:同一样本上显示的不同相机视场。 CCD/EMCCD 的视场较小,而 CMOS 相机的视场范围为 18.8-29 毫米,并且可以是正方形或矩形。

介绍

相机可以成像的区域称为视场或 FOV,FOV 越大,您可以看到的样本就越多。拥有大视场可以让您拍摄包含更多数据的更高效图像,并拍摄更少的图像以捕获整个样本。但与所有相机规格一样,FOV 的变化将影响其他重要因素,例如分辨率和成像速度。

与分辨率类似,FOV 取决于显微镜和相机,两者都有最大 FOV 的上限。通过将大视场相机与大视场显微镜配对,可以立即捕获大部分样品,而使用较小视场相机与大视场显微镜将限制您可以接收的数据量,即使显微镜可以提供更多数据。

相机视野

相机视场角取决于两个因素:相机传感器的尺寸和总放大倍率。传感器尺寸可以通过多种方式测量,但常用的测量方法是传感器对角线的尺寸,因为有些传感器是正方形的,有些传感器是矩形的。通常以毫米为单位显示,并且可以在图 1中看到一系列相机传感器尺寸。

CCD 和 EMCCD 通常具有尺寸较小的传感器,尺寸约为 11 毫米,这限制了您可以成像的范围,并且远低于大多数显微镜的最大值。

CMOS 相机提供更大的传感器,对角线通常约为 18.8 毫米,与某些显微镜型号非常匹配。有些显微镜的对角线长度可以超过 20 毫米,因此 CMOS 相机也提供传感器尺寸为 22 毫米、25 毫米甚至 29 毫米的产品。

这些较大的传感器通常具有更多的像素,因此,虽然 EMCCD 将具有 0.25 兆像素 (MP),但 CMOS 相机包含 1-15 MP,具体取决于像素大小。

放大

如果放大倍数为 1 倍,具有 25 毫米对角线 FOV 的相机只能对这么大的区域成像。在典型的生命科学放大倍数为 40 倍的情况下,相机视场减小了 40 倍,从而产生 625 µm 对角线视场。

放大倍数越大,FOV越小,如图2所示。然而,高分辨率取决于高放大倍率(有关更多信息,请参阅我们的分辨率文章),并且通过较小的视场也可以获得高相机速度。所以为了以大视场成像,它会影响成像中的其他因素。幸运的是,大多数生物样本都很小(从细胞到分子),通常不需要相机可以提供的整个视场。

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图 2:视场随着放大倍率的增加而减小,从而限制了您可以在更高放大倍率下成像的区域。

匹配相机和显微镜 FOV

需要记住的一件事是,显微镜视场是圆形的,而相机视场是方形/矩形的,如图3 顶部所示。将 18 毫米 FOV 相机与 18 毫米 FOV 显微镜配对确实会导致某些区域无法成像,但这在很大程度上是所有成像系统的共同因素,除非将来出现圆形相机传感器。因此,目前相机的视场角应该适合显微镜的视场角,这意味着最好匹配相机和显微镜之间的视场角。

一些矩形相机传感器通常可以根据尺寸更有效地占据显微镜视场,但如果相机视场大于显微镜视场,就会出现渐晕,这是由于缺乏光线而在图像的角落看到的效果,如下所示见图3 Bot。虽然这可以捕获更多的显微镜视场,但每个图像角落处的大量图像伪影可能会导致图像质量下降。

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图 3:将相机 FOV 与显微镜FOV 相匹配。顶部 。 18 毫米 FOV 显微镜与 18 毫米 FOV 相机相匹配,该相机安装在显微镜圆形 FOV 内。机器人。拥有比显微镜更大视场的相机可以捕获更多图像,但会带来渐晕伪影。

将适配器 FOV 与相机和显微镜 FOV 相匹配

需要使用显微镜 C 接口或 F 接口适配器将科学相机连接到显微镜相机端口。安装螺纹是标准化的,这意味着 C 接口适配器将连接到所有通过 C 接口连接的科学相机。然而,适配器是显微镜专用的,这意味着虽然任何 C 接口相机都可以连接到 C 接口适配器,但该适配器仅适合匹配品牌的显微镜。

适配器中可以装有镜头,可以在图像到达相机之前放大或缩小图像。这可用于更好地将相机视场与显微镜视场匹配。例如,如果相机具有 11 毫米对角线 FOV,但显微镜具有 18 毫米 FOV,则 0.67 倍适配器将缩小图像并允许其显示在 11 毫米相机上。然而,FOV 的增加是以分辨率降低为代价的。

如果目标只是将相机连接到显微镜,则 1x 适配器不包含额外的镜头,也不提供额外的放大或缩小功能。这通常是首选方法,因为它不会在系统中引入额外的镜头。每增加一个镜头,到达相机的光子数量就会减少 3-4%,因此许多研究人员会尽力避免这种情况。

根据所使用的适配器类型,适配器还会影响显微镜和相机的视野。 C 接口适配器是最流行的显微镜相机适配器,最大 FOV 限制为 22 毫米。 F 接口适配器是一种较大格式的适配器,能够达到 >30 mm FOV。

可利用 F 接口的更大 FOV 显微镜和科学相机的开发相对较新 - 在撰写本文时,仅存在一种商用 25 mm 显微镜。大多数现代显微镜的视场为 19 毫米或 22 毫米,因此仍然可以使用 C 接口。最大格式的旋转盘共焦系统也仅限于 22 毫米 FOV。

选择相机以最大化显微镜视野

Teledyne Photometrics,我们的目标是制造能够与所有现代显微镜的 FOV 最佳匹配的相机(表 1)。因此,Prime 95B 系列包括 19 毫米相机、22 毫米相机和 25 毫米相机。此外,Prime BSI 和 Iris 9 均适合 19 毫米显微镜视场,Iris 15 适合 25 毫米显微镜视场。 Kinetix 是我们最大规格的传感器,可用于在任何系统中获得最大 29 毫米的 FOV。

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表 1: Teledyne Photometrics 相机经过优化,可匹配任何最大 29 毫米的显微镜。

通过认识到 FOV 要求可能存在很大差异,我们能够更好地满足客户的需求,并提供广泛的相机 FOV 选项。

概括

相机的视野决定了您可以看到多少样本。凭借更大的视场,相机可以更有效地成像并以更少的图像捕获样本。但在高倍率下,为了提高速度,FOV会减小,需要与显微镜型号相匹配。牢记这一点,您可以最大化视野并执行更高效的成像。

审核编辑 黄宇

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